Une gamme de produits spécialement conçus pour les capsules réactives à l'immunofluorescence, dont la formule unique permet à la fluorescence du colorant de ne plus décliner.Les agents de scellement anti - Fluorescence couramment utilisés sontAF1Et,AF2Et,AF3Et,AF4Et,AF87Et,l' AF100Et,AF200Et,AF300Et,CFM-1Et,CFM-2Attendez un peu! Certains de ces produits contiennentDappy,Noyaux ou muqueuses colorablesADNExpérimentations.

En ce qui concerne les agents de trempe anti - fluorescents, trois courants: gallate de propyle de type phénoliqueGallate de n-propyle (NPG), paraphénylènediamine de type aminep-Phénylénediamine (PPD)Du type amine1,4-diazabicyclo-octane(DABCO), triéthylènediamine. La théorie de base de l'extinction par fluorescence est de telles gouttes: l'oxygène dissous ordinaire dans la tranche de tissu devient de l'oxygène monolinéaire à l'état excité, l'oxygène monolinéaire est similaire aux radicaux libres d'oxygène, cette chose est le principal meurtrier de l'extinction par fluorescence, l'agent anti - extinction que nous ajoutons est principalement réagissant avec ce monstre, éliminant directement l'oxygène monolinéaire. Notez que l'ajout d'agents anti - trempe à l'agent de scellement tend à réduire la quantité totale de fluorescence au stade primaire de l'excitation, ainsi queADNRisque de réaction de liaison avec le colorant. Regardez les avantages et les inconvénients de ces trois réactifs:PPDPeut réagir avec les colorants d'anthène (en particulierCy2), donc ce type de joints de teinture ne doit pas être considéréPPDAgent de scellement;NPG, non toxique, coloration fluorescente des cellules vivantes préféré ce type d'agent de scellement, maisNPGInterférer avec le processus d'apoptose, les étudiants qui effectuent de telles études font beaucoup d'attention, essayez d'éviter de contenirNPGAgent de scellement;DABCOPas commePPDSi efficace et peu toxique, il peut être utilisé sur des cellules vivantes, mais avecNPGDe même, il y a une interférence dans le processus d'apoptose.

Beaucoup de scellants empilés ici, comment trouver rapidement celui dont vous avez besoin? La pensée simple est:

Première étape, coagulée ou non? La coagulation est pratique pour le stockage et l'extraction, à considérer est la contraction de la Feuille de tissu pendant la coagulation ainsi que la contraction qui nécessite une étape de déshydratation. Type non - Coagulant à considérer est la volatilisation de l'agent de scellement et les fuites latérales, bien sûr besoin de la lame de verre (parfois aussi besoin d'un joint en silicone)espaceur), et souvent les lamelles doivent également être scellées, vernis à ongles couramment utilisés, cire dentaire,VALAP (mélange égal de vaseline, lanoline et paraffine mélangé sur une plaque chauffante à 60°C)Appliquez autour de la lame, le vernis à ongles prend plus de temps à sécher et risque de contaminer la lentille; La cire dentaire peut se solidifier plus rapidement à température normale;VALAP (mélange égal de vaseline, lanoline et paraffine mélangé sur une plaque chauffante à 60°C)Il est couramment utilisé dans la fixation de cellules vivantes.

Étape 2: besoin de glycérol (soluble dans l'eau) ou non glycérol (soluble dans les lipides)? La glycérine peut être miscible à n'importe quelle proportion d'eau, peut être soluble dans la phase éthanol, mais pas dans l'huile. Sachant cela, il est beaucoup plus facile de choisir. Quel est votre système de réaction organisée? Avec de l'eau, on choisit le glycérol (soluble dans l'eau). Après un traitement rigoureux de déshydratation, on choisit ceux qui ne sont pas à base de glycérol (solubles dans l'huile).

Troisième étape, indice de réfraction de l'agent de scellement. Les feuilles colorées sont sélectionnées avec un agent de scellement pour l'indice de réfraction dans1.52à1.54La meilleure transparence entre; Les tissus non teints sont mieux scellés avec un agent de scellement avec un indice de réfraction élevé ou faible, un tel agent de scellement peut éliminer les différences sphériques et obtenir la meilleure image possible.

Présentation des agents filmogènes utilisés:

Alcool polyvinyliquepoly (alcool vinylique): substance macromoléculaire organique, non toxique, soluble dans l'eau, un agent filmogène couramment utilisé. Différents numéros en fonction de leur degré de polymérisation et d'alcoolyse, tels queMowiol ® 4 à 88- Oui.PVAD'autres substances peuvent également être ajoutées ou réagir pour modifier le traitement, par exemplePermafix-1Est modifiéePVA- Oui.

Polyvinylpyrrolidone(polyvinylpyrrolidone)abréviationPVPC'est un composé macromoléculaire non ionique et un agent filmogène couramment utilisé.

Guide d'achat de produits:

l AF1 :L'ingrédient de base est la glycérine,PBSTampon, agent de trempe anti - fluorescent, autres composants, etc., indice de réfraction1.46,PH10Gauche et droite, adapté à la détection de coupes de tissus, de cellules mortes, imbibées de glycérol, POISSON (y compris CARD-FISH)Le sceau de etc.

l AF2 :Les composants de base sont la glycérine, l'agent de trempe anti - fluorescent, d'autres composants, etc., sans tampon propre. Indice de réfraction1.47L'avantage du produit est qu'il n'y a pas de tampon propre et peut être compatible avec n'importe quel autre tampon.

l AF3 :Les ingrédients de base sontPBSTampon, agent de trempe anti - fluorescent, autres composants, indice de réfraction1.34Particulièrement adapté pour la détection de cellules vivantes.

l AFR3 :Les ingrédients de base sontPBSTampon, un agent de trempe anti - Fluorescent de dernière génération (non amine non phénolique), d'autres ingrédients, etc.

l AF4 :Aussi appeléMilieu de montage glycérol/gallate de n-propyleAgent de scellement, l'agent anti - Fluorescent réceptif ajouté est le gallate de propyleGallate de n-propyle (NPG)- Oui.

l AF87: l'endroit spécial contient l'immersion d'huile sans fluorescence, qui est un agent de scellement spécialement conçu pour l'observation sous un miroir à haute multiplication, pourLe dapiLa teinture est particulièrement utile (Le dapiTendance à évacuer dans les comprimés à base de glycérol).

l AF100 :Les ingrédients de base sontPBSTampon, agent anti - Fluorescent réceptif, autres ingrédients, etc., il s'agit d'un agent de scellement sans glycérine qui doit être associé àCFPVOHLa solution est utilisée conjointement. Pré - mélange requisl' AF100etCFPVOHSolution, avec combien mélanger combien, après mélange10Utilisé en heures. Indice de réfraction de cet agent de scellement1,34 à 1,35.

l AF200 :Avecl' AF100La même classe, la différence,AF200Est à base de glycérol,Agent dépérissant anti - Fluorescent de type Amine, adapté aux capsules anthocyanes, Alexa, hoeches, etc.

l AF300 :Avecl' AF100La même classe, la différence,AF300Est à base de glycérol, agent dépérissant anti - Fluorescent de type phénolique.

l CFMLes indices de réfraction des agents de scellement de la série sont tous1.52, égale ou sensiblement égale à l'indice de réfraction de la feuille porteuse et du verre de la Feuille de couverture utilisés, ce qui est utile pour obtenir une image parfaite. Principalement utilisé sous un Microscope confocal au laser, ou dans le cas où un hyperviseur nécessite une immersion dans l'huile pour remplacer l'immersion dans l'huile.CFM-1deLe pHEnviron6.5,.CFM-1 Plus AntifadentdePHValeur approximative10,CFM-2depH deEnviron~ 8,5,CFM-3dePHLa valeur est proche de la neutralité.

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